為什么細胞培養(yǎng)需要用二氧化碳培養(yǎng)箱?
一般細胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng)),所以大多數培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時,常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。對大多數以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時細胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。
污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,因而,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,并結合自動排除污染裝置來有效防止污染的產生。
例如,鑒于二氧化碳培養(yǎng)箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長,為確保培養(yǎng)箱免受污染且保證儀器箱體內的生物清潔性,開發(fā)設計了帶有紫外清潔功能的增強型二氧化碳培養(yǎng)箱;*銅外殼HEPA濾器能過濾培養(yǎng)箱內空氣,可過濾除去99.97的0.3um以上的顆粒(上海潤度生物提供的培養(yǎng)箱可過濾除去99.97的0.2um以上的顆粒),并能有效殺死過濾時被擋在濾器內的微生物顆粒;此外,自動殺菌裝置能使箱內溫度達到90℃或更高溫度從而殺死污染微生物,當它與HEPA系統(tǒng)結合使用就能夠極大的減少污染。這些裝置對于細胞培養(yǎng)來說是必不可少,但選擇何種清潔裝置呢?當然功能越多越好,但是價格也會隨之上升。如果經費有限,只能選擇一個價格較便宜的,這時就應該配合使用一些消毒劑和除菌劑,經常進行消毒滅菌,也能達到貴儀器的效果,只是比較麻煩一點而已。
總之,無論選擇何種裝置,都要時刻注意保持培養(yǎng)箱的清潔,經常清理箱體,這樣才能增加儀器的使用壽命,并使實驗順利進行,保證結果的可靠性。